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waters液相色谱柱使用过程中须注意的事项
点击次数:245 发布时间:2018-05-15 返回
   waters液相色谱柱使用过程中须注意的事项
  waters液相色谱柱是指利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对混合物进行先分离,而后分析鉴定的仪器。waters液相色谱柱根据固定相是液体或是固体,又分为液-液色谱(LLC)及液-固色谱(LSC)。现代waters液相色谱柱由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较,具有、快速、灵敏等特点。waters液相色谱柱系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。在使用waters液相色谱柱过程中,须注意以下事项:
  1、新waters液相色谱柱在使用前,须先用甲醇或乙腈试剂以20倍柱体积低流速冲洗,作用是使固定相能充分润湿、碳链舒展彻底,使waters液相色谱柱的性能达到zui好状态。具体操作是,将配制好65%的乙腈/水冲洗后,把waters液相色谱柱进口端连接在色谱仪上,出口端放空(不可连上检测器,以免污染了检测器),以0.1ml/min~0.5ml/min的低流速将色谱柱中的清稀溶液吹干,过20分钟后再接上检测器,以1.0ml/min的流速,继续冲洗2~8小时;
  2、waters液相色谱柱检测分析样品完毕后,须冲洗色谱柱。尤其是流动相中含有酸或盐时,需将色谱柱中的酸或盐冲洗干净,通常建议用10%甲醇水冲洗20倍柱体积;
  3、若waters液相色谱柱处于长期闲置状态时,要将色谱柱彻底冲洗,建议冲洗3-4小时以上,zui后保存在纯有机试剂或高比例的有机试剂溶液(如90%甲醇水)中;
  4、由于waters液相色谱柱的固定相疏水性较强,waters液相色谱柱在使用过程中尽量不要使用高水相条件,若水相比例过高易引起固定相疏水塌陷,引起柱效迅速下降,甚至造成不可逆的负面影响;由于碳载量高,表现尤为明显,建议使用过程中水相比例不超过90%;
  5、waters液相色谱柱压力升高、柱性能下降:通常为色谱柱被污染,对waters液相色谱柱进行再生处理可恢复部分柱效;
  6、waters液相色谱柱压力骤升:通常由盐析出或筛板堵塞引起,若是盐析出,用10%甲醇水低流速冲 洗至压力恢复即可;若判断并非盐析出,以纯甲醇或10%甲醇水为流动相反冲色谱柱(将waters液相色谱柱反接,不接检测器),若反冲半小时仍无效果则说明反冲无效,需寻找其他原因。
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